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首頁-譜標(biāo)服務(wù)-液相色譜儀HPLC(六)化學(xué)發(fā)光檢測器

液相色譜儀HPLC(六)化學(xué)發(fā)光檢測器

發(fā)布時間:2022-03-28       點擊次數(shù):8803

液相色譜儀HPLC的化學(xué)發(fā)光檢測器原理:化學(xué)發(fā)光是指在沒有任何光、電、熱的作用下,只是由于反應(yīng)體系中某種物質(zhì)(反應(yīng)物、產(chǎn)物、中間體或熒光物質(zhì))的分子吸收了反應(yīng)所釋放的能量而由基態(tài)躍遷至激發(fā)態(tài),然后再從激發(fā)態(tài)返回基態(tài),同時將能量以光輻射的形式釋放出來,產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光的現(xiàn)象。在固相、液相、氣相反應(yīng)中均能觀察到化學(xué)發(fā)光。

由于物質(zhì)激發(fā)態(tài)的能量是來自化學(xué)反應(yīng),故叫作化學(xué)發(fā)光。當(dāng)分離組分從色譜柱中洗脫出來后,立即與適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)發(fā)光試劑混合,引起化學(xué)反應(yīng),導(dǎo)致發(fā)光物質(zhì)產(chǎn)生輻射,其光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度成正比。

液相色譜儀HPLC的化學(xué)發(fā)光檢測器不需要光源,也不需要復(fù)雜的光學(xué)系統(tǒng),只要有恒流泵,將化學(xué)發(fā)光試劑以一定的流速泵入混合器中,使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光,通過光電倍增管將光信號變成電信號,就可進(jìn)行檢測。這種檢測器的最小檢出量可達(dá)10~12g。

化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的兩個關(guān)鍵步驟: 激發(fā)和發(fā)射。

第一是反應(yīng)必須能夠提供足夠的激發(fā)能。通常只有那些反應(yīng)速度相當(dāng)快的放能反應(yīng),其焙變介于170-300kJ/mol之間,才能在可見光范圍內(nèi)觀察到化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象。

第二是化學(xué)反應(yīng)的能量至少能被一種物質(zhì)所接受并產(chǎn)生激發(fā)態(tài)。

第三是處于激發(fā)態(tài)的分子或原子能夠釋放出光子或者將其能量轉(zhuǎn)移給另一個分子,使此分子激發(fā),然后以輻射光子的形式回至基態(tài)。

化學(xué)反應(yīng)要產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光需滿足的條件:

第一,該反應(yīng)必須能夠提供足夠的能量且可以被某種反應(yīng)產(chǎn)物或是中間體吸收,使之處于激發(fā)態(tài),在許多氧化還原反應(yīng)中所提供的能量都能滿足此條件,因此大多數(shù)氧化還原反應(yīng)都是化學(xué)發(fā)光反應(yīng);

第二,化學(xué)反應(yīng)的能量至少能被一種物質(zhì)所接受并使之生成激發(fā)態(tài)。對于有機(jī)分子的液相化學(xué)發(fā)光而言,從能量上看,容易生成激發(fā)態(tài)產(chǎn)物的往往是一些芳香族化合物和撥基化合物;

第三,處于激發(fā)態(tài)的分子或原子必須具有一定的化學(xué)發(fā)光量子效率使其能釋放出光子,或者能夠轉(zhuǎn)移它的能量給另一個分子使之進(jìn)入激發(fā)態(tài)并釋放出光子。由此可見,能夠用于HPLC柱后檢測的化學(xué)發(fā)光是由一些高能量、不放熱、不做電功或其它功的化學(xué)反應(yīng)所釋放的能量,去激發(fā)體系中某些化學(xué)物質(zhì)分子而產(chǎn)生的次級光發(fā)射, 利用產(chǎn)生的化學(xué)發(fā)光來對經(jīng)色譜分離的被分析化合物進(jìn)行測定

 

液相色譜儀HPLC化學(xué)發(fā)光檢測器的優(yōu)點

化學(xué)發(fā)光檢測器( CD)是近年來發(fā)展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器,具有設(shè)備簡單、價格低廉、線性范圍寬等優(yōu)點。
1靈敏度高

2選擇性好,僅對被測組分有響應(yīng)

3樣品可直接分析,不需要前處理

4新型檢測器

5結(jié)構(gòu)簡單

6線性范圍寬

3. 缺點
使用的反應(yīng)氣或化學(xué)發(fā)光反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)常是危險性的氣體

在眾多的液相色譜儀HPLC檢測器中,化學(xué)發(fā)光檢測器(CLD)結(jié)構(gòu)簡單,靈敏度高。在大多數(shù)情況下,它的靈敏度比紫外一可見光檢測器高2-3個數(shù)量級,由于它沒有光源,不存在散射光引起的背景,用于熒光物質(zhì)檢測時,靈敏度比熒光檢測器更高,對某些物質(zhì)的檢測甚至可與激光誘導(dǎo)熒光檢測器媲美,靈敏度可達(dá)10-21mol的單分子水平。將高靈敏度的化學(xué)發(fā)光檢測器與高分辨的高效液相色譜(HPLC)分離手段以適當(dāng)?shù)姆绞较嗟満?,集分離與分析之精華于一體,發(fā)展成為一種理想的分析方法。

 

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TEL:400-800-3875