Quad 7500 LC-MS/MS三重四級桿液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用系統(tǒng)應(yīng)用技術(shù)

1 生物基質(zhì)中多肽/蛋白質(zhì)制劑的定量分析對于新藥研發(fā)來說至關(guān)重要。作為與傳統(tǒng)的配體結(jié)合試驗(yàn)并行的分析技術(shù)，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)已經(jīng)發(fā)展成為生物分析實(shí)驗(yàn)室中蛋白質(zhì)定量檢測的日常手段。與現(xiàn)今的LBAs技術(shù)相比，三重四極桿系統(tǒng)在檢測小體積樣品中的低濃度分析物方面的能力使其成為主要的分析手段。
結(jié)論：基于SCIEX Triple Quad 7500 LC-MS/MS系統(tǒng)-QTRAP Ready開發(fā)了高靈敏度的肽段定量檢測流程。通過具有E Lens技術(shù)的OptiFlow Pro離子源和D Jet離子導(dǎo)向的整
合，在生物基質(zhì)中特征肽段定量檢測時與以往產(chǎn)品相比，靈敏度平均提高了3倍。

2 大鼠血漿中完整賴脯胰島素超靈敏的定量方法
胰島素類似物是通過在天然胰島素結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上進(jìn)行改造，形成等效或增效血糖控制的胰島素替代物。它們中的膳食胰島素類似物，如賴脯胰島素、阿斯巴甜胰島素、格列嗪胰島素，與人胰島素相比更容易吸收、起效更迅速，因此研究此類胰島素類似物的藥代動力學(xué)和藥效學(xué)屬性至關(guān)重要。

結(jié)論
• 建立了基于SCIEX Triple Quad™ 7500 LC-MSMS系統(tǒng) - QTRAP® Ready檢測大鼠血漿中賴脯人胰島素MRM定量方法，該方法靈敏度高。
• 賴脯人胰島素在大鼠血漿中的定量下限為0.1 ng/mL，該方法分析重現(xiàn)性、準(zhǔn)確度、定量線性良好。
• SCIEX 7500系統(tǒng)有超高的靈敏度，得益于其配有E Lens技術(shù)加持的OptiFlow Pro離子源和D Jet離子導(dǎo)向技術(shù)。

3 高通量靶向脂質(zhì)組學(xué)方法實(shí)現(xiàn)廣泛的脂質(zhì)定量
脂質(zhì)組學(xué)中直接進(jìn)樣的鳥槍法是一種廣泛使用的脂質(zhì)組學(xué)分析方法。該方法快速簡單，但是會受到明顯的離子抑制效應(yīng)，同時，由于脂質(zhì)分子眾多并伴有大量同分異構(gòu)體的峰重疊，從而使得精確辨認(rèn)每一種脂質(zhì)十分困難。正相和反相液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用也被廣泛應(yīng)用于脂質(zhì)組學(xué)研究。液質(zhì)聯(lián)用方法可以根據(jù)脂類物質(zhì)理化性質(zhì)的不同對其進(jìn)行分離，但是建立一個能夠同時檢測盡可能多的不同類別的脂質(zhì)分子的定量方法仍然極具挑戰(zhàn)。

結(jié)論：提出了一種靶向的脂質(zhì)組學(xué)分析策略，該策略能夠在脂質(zhì)分子水平上對多種不同的脂質(zhì)進(jìn)行定量(~1900個分子種類)。該方法可以對不同脂類進(jìn)行色譜分離，減少同分異構(gòu)體的干擾，更加快速和特異的進(jìn)行脂質(zhì)篩選。靶向脂質(zhì)列表十分全面，涵蓋了大部分脂類。所選取的MRMs離子對覆蓋12-26個碳、0-6個雙鍵的脂肪酸、包括奇數(shù)側(cè)鏈的脂類物質(zhì)。該MRM列表是個性化定制的，可以添加新的脂類、亞類和多種脂質(zhì)分子。利用血漿基質(zhì)結(jié)合LC-MRM分析進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，方法靈活度高，得到的結(jié)果可靠穩(wěn)定。開發(fā)的簡單工具(sMRM Pro Builder模板)可以將靶向MRM方法的優(yōu)化過程流程化，從而在進(jìn)行大量Scheduled MRM離子對掃描時得到高質(zhì)量的結(jié)果。

4 人全血中法醫(yī)類化合物的高靈敏度檢測
保持可靠定量的同時，也可實(shí)現(xiàn)低水平檢測是任何穩(wěn)定生物分析工作流程的關(guān)鍵性能指標(biāo)。在法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，超寬濃度范圍下，對復(fù)雜生物基質(zhì)樣本中的大量分析物同時進(jìn)行精準(zhǔn)定量的能力是非常有挑戰(zhàn)性的，通常需要稀釋樣品，以使其處于儀器的線性范圍內(nèi)。為了進(jìn)一步減少樣品制備和再分析時間，要求采集到足夠多的化合物色譜峰，并且獲得寬線性動態(tài)范圍，以確保全面的分析物覆蓋率和可靠的定量性能

結(jié)論：使用SCIEX Triple Quad 7500系統(tǒng)檢測人全血中49種毒物的優(yōu)化且靈敏的方法。SCIEX OS軟件中的Scheduled MRM Algorithm Pro功能實(shí)現(xiàn)了數(shù)據(jù)采樣方法的優(yōu)化。新硬件OptiFlow Pro離子源、D Jet離子導(dǎo)向技術(shù)和E Lens技術(shù)提供了對所有目標(biāo)毒物亞- ng/mL級別靈敏度，有些甚至可以降至pg/mL級別，同時保持測量的線性、精確度和準(zhǔn)確性。這種超乎尋常的靈敏度的獲得，是在沒有任何數(shù)據(jù)質(zhì)量的犧牲或妥協(xié)的情況下實(shí)現(xiàn)的，正如在LLOQ下，觀察到的極佳的精確度和準(zhǔn)確性所證明的那樣?？傮w而言，SCIEX Triple Quad 7500系統(tǒng)的所有功能結(jié)合在一起，使得本研究中所檢測的一系列毒物的靈敏度得到了大幅提高。

5 提高靶向宿主細(xì)胞蛋白肽段定量分析靈敏度的策略
宿主細(xì)胞蛋白（Host cell proteins, HCPs）是與重組生物藥制劑生產(chǎn)過程相伴產(chǎn)生的主要雜質(zhì)種類。其含量與制劑的安全性和有效性密切相關(guān)，因此從制劑開發(fā)到質(zhì)量控制整個過程都非常需要對HCPs進(jìn)行定量測定。在下游生產(chǎn)和質(zhì)量控制階段，需要靶向定量的HCPs通常是預(yù)先制定好的，它們在最終制劑或之后純化步驟中痕量存在。這使得對于建立更高靈敏度、更快速分析、更皮實(shí)耐用、更具復(fù)合分析能力（一針進(jìn)樣定量更多的分析物）的靶向HCP分析方法的需求更加強(qiáng)烈。三重四極桿和QTRAP液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)由于其優(yōu)異的定量分析能力，是開展這項(xiàng)工作的理想平臺。
結(jié)論：靶向HCP定量分析流程的建立體現(xiàn)了SCIEX 7500系統(tǒng)的高靈敏度、高分析通量、高耐用性以及高復(fù)合分析能力信噪比平均提高4倍具有極其優(yōu)異的靈敏度，其中2/3的目標(biāo)蛋白為0.02-1 ppm。其余的為1-4.54 ppm在高確信度(每個蛋白4個檢測通道)的情況下，所有48個蛋白質(zhì)的定量用8min的液質(zhì)聯(lián)用分析方法完成

6 促尿鈉排泄肽類家族環(huán)肽類化合物L(fēng)C-MRM定量靈敏度的提高環(huán)肽類化合物如今已成為重要藥物。這與其在血液中的穩(wěn)定性以及口服給藥劑量相關(guān)。采用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)開發(fā)對生物樣本中環(huán)肽類化合物的痕量定量檢測仍具有非常大的挑戰(zhàn)，生物樣本基質(zhì)中的高背景干擾要求液質(zhì)方法有很好的選擇性，都能獲得期望的靈敏度。由于環(huán)肽類化合物的三級折疊結(jié)構(gòu)以及其結(jié)構(gòu)中缺乏活潑的質(zhì)子，也會經(jīng)常防礙產(chǎn)生碎片離子。
結(jié)論：在SCIEX Triple Quad™7500 LC-MSMS系統(tǒng)- QTRAP® Ready上建立了環(huán)肽類化合物定量的方法，該方法靈敏度高。人ANP和BNP在大鼠血漿中的定量下限為0.05ng/mL，分析方法重現(xiàn)性、準(zhǔn)確度、定量線性良好。在配有E Lens技術(shù)的OptiFlow Pro離子源和D Jet離子導(dǎo)向技術(shù)的加持下，本文的方法與之前報道方法相比，靈敏度有顯著提高

7 直接檢測飲用水和瓶裝水中農(nóng)殘和PPCPs的LC-MS/MS方法
飲用水分析的限量值（prescribed consent values, PCV）極低且嚴(yán)格。水供應(yīng)商和公用事業(yè)公司需要確保他們送去裝瓶或進(jìn)入供水網(wǎng)絡(luò)的最終水產(chǎn)品是安全的，并且符合國家的法規(guī)要求。1,2,3水可能是一個具有挑戰(zhàn)性的基質(zhì)，尤其是在進(jìn)入水處理過程之前的來自河流、湖泊或水庫的水。因此，為自來水公司提供服務(wù)的實(shí)驗(yàn)室必須有高靈敏度的儀器，來精確的定量超出PCV限值的數(shù)據(jù)和面對各種基質(zhì)的挑戰(zhàn)。
結(jié)論：通過水中431種化合物的定量分析，證明了SCIEX TripleQuad 7500 LC-MS/MS系統(tǒng)- QTRAP Ready靈敏度高，在低濃度化合物(ng/L級別的痕量測定)的測定分析領(lǐng)域具有很大潛力;樣品直接進(jìn)樣分析，無需復(fù)雜前處理過程，提高了工作效率;采用直接進(jìn)樣的方式即可使水研究實(shí)驗(yàn)室超越現(xiàn)在的靈敏度極限;SCIEXOS軟件操作簡單靈活。采用本文的工作流程可大大縮短從采樣到出報告的時間，這將對水環(huán)境的監(jiān)測和質(zhì)量把控工作提供積極的影響。
可以根據(jù)客戶的實(shí)際需求進(jìn)行化合物的擴(kuò)充，也可以應(yīng)用到其他低濃度痕量物質(zhì)的測定工作流程中。創(chuàng)新的SCIEX 7500系統(tǒng)可以有效降低基質(zhì)效應(yīng)，提高靈敏度，這必將引領(lǐng)水行業(yè)進(jìn)入一個新的分析時代。